下面是小编为大家整理的做核酸检测感悟,供大家参考。希望对大家写作有帮助!
做核酸检测的感悟6篇
最近重新研读了分子克隆第三版,有一个有趣的小发现,好像过去没听人说过。一般测核酸浓度都是用260nm的光吸收值来决定,同时用260/280的比值来判断有无蛋白质污染。理想的比值是1.8~2.0左右。分子克隆第三版专门提到这种判断核酸纯度的办法是不可靠的。原因在于蛋白质在260nm的消光系数比核酸小很多,即使有相当多的蛋白质污染,这个比值还是接近于理想的比值。另外,260/280比值尤其不能用于评判寡聚核甘酸的纯度,因为嘌呤的消光系数比嘧啶大好多,寡聚核甘酸嘌呤嘧啶组成很可能不平均,所以很可能出现很纯的样品260/280比值却比较小的情况。
你所说的‘消光系数‘,是否就是吸光值的意思?如果你用连续波长测过核酸的吸光度时,就会发现,OD260,恰好是核酸吸光值最大的时候,从200-750,是一条曲线,260时是波峰,而280时,刚好是曲线下降到一半左右时的吸光值。而恰好280又是蛋白质的最佳吸收值。如果纯的核酸,那曲线就是标准的,260/280就是1.8-2.0之间,如果混有蛋白质,多肽,酚之类的杂质,那280时的吸收峰就变高了,曲线随之发生变形,而260时的吸收峰不变。就如你所说的“原因在 于蛋白质在260nm的消光系数比核酸小很多”,因此260的吸收峰几乎不变。但280时却不一样。这时相反,核酸的消化系数比蛋白质小的多,因此,一旦有污染,280上升很快。因此260/280在有污染的情况下就会变小。所以,用260/280的方法,还是比较可靠的。当然更可靠的,就是用200-750的波长,连续扫描。直接观察核酸的整条曲线,那比光靠260,280两个吸收值,肯定要准确很多。其实平时在我们检测时,我们也会检测230,320,两个值。至于这两值的作用,我稍后再说。其实有230,260,280,320,这四个点。基本上也能确定下这条曲线的该一段的形状了。
A 260 / A 280 的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm。纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者 2.0(RNA)。如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A 230 表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸 A 260 / A 230 的比值大于 2.0。A 320 检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A 320 一般是 0。(320差不多也就是那条曲线刚下降到0的时候)。所以,当我们检测260/280后,如果比值在1.8-2.0之间时,我们可以说其纯度可以,那OD260的值就有效。否则,OD260的值判为无效。你说的嘌噙与嘧啶的吸光值,确实没错。但一般情况下,我们测的都是基因组、tRNA,mRNA、cDNA,所以其CG含量都比较均匀。都适用于这种方法。然而,在测某些CG含量明显不均匀的情况下,比如人工合成的寡核苷酸、引物,在CG含量过大或者过小的情况下,我们就不能用260/280的方法了。不过一般自已合成的引物,都能保证纯度的,买来的引物,或者托公司合成的寡核苷酸,也不需要我们用OD值方法重新测一下。因为产品包装上写着多少个OD,序列长度,都非常详细,纯度也是有保证的。
当OD 260/ OD280值=1.8说明所提的DNA质粒的纯度比较高,所含的RNA或蛋白质污染很少,当 OD 260/ OD280值>1.8,说明有RNA污染,当OD 260/ OD280值
核酸检测技术的应用
规ELISA检测。部分标本因为ELISA检测项目不合格直接被淘汰而未进入到核酸检测环节,有303616份标本分别实行混样核酸检测(191222人份)和单人份核酸检测(112394人份)。⑴混样核酸检测:按照试剂盒说明书要求,筛选ELISA检测合格标本实行8个标本混样核酸检测,无反应性pooling的8个标本视为该项目核酸检测合格,有反应性pooling实行标本的拆分单检,拆分无反应性的标本判为合格,拆分亦有反应性的标本判为该项目核酸检测不合格。⑵单人份核酸检测:采用单个标本核酸检测模式,按照试剂盒和全自动核酸检测设备要求实行检测,检测无反应性的标本视为HBVDNA、HCVRNA、HIV-1RNA项目联检合格,检测有反应性的标本则视为HBVDNA、HCVRNA、HIV-1RNA项目联检不合格。
1.2统计学处理采用x²检验,比较各项目不合格率的差异,p
核酸检测标本可以采集深部痰液、鼻咽拭子和口咽拭子。其中口咽拭子和鼻咽拭子统称为咽拭子,经口的为口咽拭子,经鼻的就是鼻咽拭子。
核酸检测标本可以采集深部痰液、鼻咽拭子和口咽拭子。其中口咽拭子和鼻咽拭子统称为咽拭子,经口的为口咽拭子,经鼻的就是鼻咽拭子。
口咽拭子
鼻咽拭子
做核酸检测时,我们需要注意什么呢?
在做核酸检测前2小时尽量避免进食,以免引起呕吐;
采样前30分钟不应吸烟、喝酒、咀嚼口香糖等;
检测者需要正确佩戴口罩,检测前取下口罩,检测后立即戴好,可准备一个备用口罩,污染后方便及时更换;
在采集鼻咽拭子前检测者应告知采集人员是否鼻中隔弯曲及鼻腔手术史,过程中可能出现鼻部酸痒感,刺激打喷嚏,可立即用纸巾或手肘遮挡;
鼻咽拭子采集后可能出现少量鼻腔出血,一般不需要特殊处理,如出血量较多请及时到医院进行处理;
在采集口咽拭子时检测者头后仰,张口发出「啊」音,有助于暴露咽喉,但过程中会出现刺激性干咳、恶心、呕吐等症状,检测者可配合采集人员尽量放松、深呼吸;
核酸检测前后都需要注意手部卫生,可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭双手。
1. 人员范围。鹿泉区域内低风险社区、农村的人员可根据需要申请开具核酸检测证明。中高风险小区村庄一般不开具核酸检测证明,因疾病就医等特殊情况确需开具的,提前电话预约,由区疾控中心上门服务。
2. 需提供材料。本人有效身份证件及新一轮全员核酸检测健康码,或提供所在社区出具的参加全员核酸检测的证明。
3. 提前预约。需开具核酸检测证明人员要提前电话预约办理的时间,区疾控中心会根据实际情况合理安排时间,避免出现人员扎堆,确保快捷办理。
看检测报告:
IgG阳性、IgM阴性、核酸阴性----康复者 IgG阳性、IgM阴性、核酸阳性----健康携带者 IgG阳性、IgM阳性、核酸阴性----即将或刚发病的确诊者 IgG阳性、IgM阳性、核酸阳性----确诊者 IgG阴性、IgM阴性、核酸阴性----正常者 IgG阴性、IgM阳性、核酸阴性----刚感染未发病者 IgG阴性、IgM阳性、核酸阳性----正在发病的确诊者 IgG阴性、IgM阴性、核酸阳性----刚感染未发病者 校验报告单 < cla>< cla>< cla>< cla>姓名 标本 烟试 年龄 临床诊断 发热 性别 门诊 类别 床号 样本号 备注 校验项目 符号 COVD-19-N 名称 N片段 校验值 阴性(一) 结论 正常值 阴性(一) 阴性(一) 阴性(一) COVD-19-1AB ORF1a\b片段 采样时间:
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李四 40岁 男 门诊 报告时间:
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学习强国争上游答题答案 第1题、因“蜀江至此分枝”得名的地方是( ) 正确答案:D.枝江 枝江市属湖北省宜昌市代管县级市。枝江历史悠久,周称丹阳,属楚,秦因“蜀江至此分枝”而得名。
第2题、新中国修建的第一条铁路是( ) 正确答案:A.成渝铁路 连接成都和重庆的成渝铁路,是新中国成立后修建的第一条铁路,在中国铁路建设史上具有里程碑的意义。1950年6月15日正式开工,1952年7月1日正式剪彩通车。成渝铁路建成后,毛泽东挥笔写下“庆贺成渝铁路通车,继续努力修筑天成路”的题词。
第3题、热带雨林中的很多植物叶片上有个很特别的地方,就是在叶片顶端会拖出一根细长的尖“尾巴”,植物学家称它为( ) 正确答案:A.滴水尖 热带雨林中的很多植物叶片上有个很特别的地方,就是在叶片顶端会拖出一根细长的尖“尾巴”,植物学家称它为滴水尖。叶片上的积水可以沿着这根尖“尾巴”流掉。
第4题、中国古代官员制度三公九卿制中的“三公”不包括( ) 正确答案:A.廷尉 中国古代官员制度三公九卿中的“三公”分别是太尉(管理军事、丞相(协助皇帝处理政事、御史大夫(监察百官。不包括廷尉。
第5题、太阳是巨大的恒星,而月球只是地球的卫星,太阳直径是月球直径的( )倍,大小差别很大。
正确答案:C.400 太阳是巨大的恒星,而月球只是地球的卫星,太阳直径是月球直径的400倍,大小差别很大。但碰巧的是,太阳到地球的距离。
第6题 慈善组织应当( )向社会公开其年度工作报告和财务会计报告。具有公开募捐资格的慈善组织的财务会计报告须经审计。
正确答案:A.每年 第7题、大象的“鼻子”不完全是鼻子,这种说法是( )的。
正确答案:A.正确 大象的"鼻子"不完全是鼻子,它没有鼻梁骨,而是由鼻和上唇构成的鼻管,大约由4000块肌肉组成,能做出各种动作。
第8题、2011年3月30日,国务院常务会议通过决议,自2011年起,每年5月19日为“中国( )” 正确答案:B.旅游日 2011年3月30日,国务院常务会议通过决议,自2011年起,每年5月19日为“中国旅游日”;“中国航天日”是每年4月24日;“中国品牌日”是每年5月10日。
第9题、第十届中国花卉博览会的会花是( ) 正确答案:A.牡丹 第10题、我国古代六艺所指的六种技能是( ) 正确答案:B礼、乐、射、御、书、数
法律状态
法律状态公告日
2001-08-15
公开
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